1 准备

⑴使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）。

⑵通电前应检查仪器之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

⑶接通电源，依次打开泵、检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

⑷打开Breeze软件，进入系统主界面。

操作步骤

⑴更换流动相。

⑵在主界面中点击“Manage Breeze”按钮，选择system选项，出现系统连接示意图，观察各部件是否连接好。若未连接好，则需点击“Diagnostics/Reconfigure”进行诊断。

⑶回到主界面，选择“Manage Breeze”中的project选项，单击“make a new project”， “Next”，在“Project Name”中输入名称，单击“Finish”。单击“Change a project/User”，在“Project”中选择输入的名称，单击“OK”。

⑷单击“View Method”按钮，点击“Pump”图标，设置泵的参数。点击“UV Det”图标，设置紫外检测器的波长。单击“Save Method”按钮保存设置方法。

⑸打开泵的抽液阀，使用泵注注射器抽取一定量的洗脱剂。单击Purge图标，出现“Purge Wizard”的对话框，选中“Purge Pump”选项，点击“Next”，调节A、B泵的流量分布为“3ml/min”。打开泵的参考阀，点击“Next”purge结束后关闭参考阀。

⑹点击主界面中的“press to equilibrate system/monitor baseline”按钮，平衡洗脱0.5—1h，直至基线稳定。

⑺点击“press to make a single injection”按钮，进入“Specify Single Inject Parameters”对话框，设置参数，点击“inject”。将进样阀手柄转动至Load位置，将注射器针完全插入进样阀入口中，平稳的注入试样溶液，待主界面出现图标提示后将进样阀手柄快速转动至Inject位置，系统将自动运行，采集数据并记录图谱。

数据处理（外标法）和打印

⑴点击系统界面中的“Find Data”图标，点击<channels>标签，选择待积分的标准，右击后选“Review”进入Review窗口。按“Processing Parameters Wizard”图标，进入Processing Parameters Wizard向导窗口，选中“start new processing parameters”，按“OK”，“Next”,确定所需的最小峰面积。按“Next”， “Next”，修改峰名称，按“Next”， “Next”，选中“External Standard Calibration”, “Next”，输入方法名称，“Finish”。点击“Save all”保存。

⑵点击主界面中的“Find Data”图标，单击“Results”标签，“update”,选中已处理的标准，点击“Preview Report”按钮，出现“Open Report Method”对话框，选中“Use the following report method”项，在下列拉表中选择所需的报告方式。单击“OK”。

⑶点击“Save Report”保存结果或按“Print”打印报告结果。

清洗系统和关机

为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶解冲洗，再用水冲洗。数据采集完毕后，关闭检测器，用100%的超纯水冲洗系统20min，再用10%甲醇溶液冲洗10min后，换纯甲醇冲洗10min，然后关泵。退出Breeze系统，关闭计算机。