岛津LC-15C高效液相色谱仪操作规程

一、准备

1．准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。

2．根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。

3．配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

4．检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

二、操作流程

1．开机：接通电源，待泵和检测器自检结束后，打开色谱工作站。

2．排气：逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀；按A/B泵的〔purge〕键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按〔purge〕键，冲洗3min后再按〔purge〕键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。

3．参数设定：通过软件设置泵流量、各流动相比例、运行时间、检测波长等参数。设置完成后下载此方法至仪器。

4．平衡系统：待达到设定参数值时，查看基线是否平稳，基线平稳则可进行进样测试。

5．进样：点击单次运行，设置好数据文件信息和保存入径后，使用注射器将样品由手动进样口注入仪器，开始检测。

6．数据处理：样品检测结束后，通过工作站的再解析分析数据。

7．关机：所有样品检测完，冲洗柱子一段时间；结束后停泵，关闭软件，切断仪器电源。

三、注意事项

1．发现记录基线波动，出现毛刺等现象，首先应检查检测器流通池中是否有气泡或污染，如不是流通池引起，可等待氘灯稳定，同时检查仪器的接地是否良好，必要时，换上新的氘灯。仪器稳定后方能进行操作。

2．进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡，如系统适用性不符合规定，或填充剂已损坏，则应更换新的同类色谱柱进行分析，由于同类填充剂的化学键合相的键合度及性能等存在一定差异，往往依法操作达不到预定的分离时，可更换另一牌号的同类色谱柱进行试验。

3．各色谱柱的使用应予登记，应包括本次测试样品及柱中的保存溶剂。色谱流路系统，从泵、进样器、色谱柱、到检测器流通池，在分析完毕后，均应充分冲洗，特别是用过含盐流动相的，更应注意先用水，再用甲醇-水，充分冲洗。如发现泵漏液等较严重的情况，应请有经验的维修人员进行检查，维修。